黄曲条跳甲钾离子通道基因实时荧光定量PCR质粒标准品的构建
Construction of reference standards for detecting potassium channel (twk) of Phyllotreta striolata (Fabricius) with fluorescence real-time quantitative PCR
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摘要: 构建黄曲条跳甲钾离子通道基因(twk)荧光实时定量PCR标准品.利用twk基因为目的基因设计引物,通过PCR、电泳、胶回收,然后与pMD18-T Vector连接并转化到感受态大肠杆菌中;氨苄青霉素筛选出白色菌落,进行菌落PCR及测序鉴定其特异性,根据OD值确定浓度,制备梯度浓度参考标准品,制作标准曲线.成功构建了twk基因实时荧光定量PCR质粒标准品,为黄曲条跳甲体内twk的精确定量,以及其他靶标基因表达的定量分析提供了重要参考.