摘要: 采用PT-PCR扩增Pyk2-kinase基因,定向克隆至转移载体pFastBac HTB,转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细菌DH1OBac中,转座后利用抗性及蓝白斑筛选阳忭克隆获得重组Bacmid/Pyk2-kinase；提取重组杆粒.PCR法鉴定后转染昆虫细胞Sf9包装重组杆状病毒；利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过间接免疫荧光(1FA)、SDS-PAGE和Western blot检测表达情况.最终获得了重组杆状病毒rBac-Pyk2-kinase,实现了Pyk 2-k inase在Sf9细胞中的重组表达,其相对分子质量为32 ku,1FA、SDS-PAGE和Western blot检测结果与预期一致.