大珠母贝组织蛋白酶D的cDNA克隆、序列特征分析及应激表达研究
Molecular cloning and characterization of cathepsin D in pearl oyster Pinctada maxima and its tissue expression profiles under Vibrio harveyi challenge
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摘要: 通过同源克隆方法和cDNA末端快速扩增技术(RACE),获得了大珠母贝(Pinctada maxima)组织蛋白酶D基因(命名为pmCTSD)的cDNA全长序列1 742 bp,其中5'非翻译区(UTR)38 bp,3'UTR 534 bp,开放阅读框1 170 bp,编码390个氨基酸,分子量约为41.9 ku,等电点约为7.57.序列特征分析表明,pmCTSD蛋白由信号肽(Met1-Ala18)、前体域(Leu 19-Lys47)和成熟域(Thr48-Asn390)3部分组成.同源性分析表明,pmCTSD氨基酸序列与其他物种高度保守,相似性介于64%~70%之间.进化分析表明,pmCTSD与栉孔扇贝亲缘关系最近,与传统分类结果基本一致.组织表达荧光定量分析发现,pmCTSD在闭壳肌、性腺、肝胰脏、外套膜和鳃组织中都有表达,但在性腺中表达量最高,肝胰脏次之.