摘要: 利用正交试验设计法L_9(3~4),从引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg~(2+)浓度和dNTP浓度4种因素3个水平,对葛资源ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对PCR反应的退火温度进行梯度筛选.结果表明,25μL最佳的葛资源ISSR-PCR反应体系是:1×PCR buffer、0.20 mmol/L dNTP、0.4 μmol/L引物、2.5 mmol/L Mg~(2+)和0.5 U TaqDNA聚合酶,引物UBC809的最佳退火温度为57.9℃.