摘要: 【目的】 非 洲 猪 瘟 病（African swine fever，ASF） 是 一 种 由 非 洲 猪 瘟 病 毒（African swine fever virus，ASFV）导致的，能引起猪高度致死的急性传染病。采用生物学手段制备检测试剂能更快、更有效地监测疫情，对 ASF 疫情的防控尤为重要。【方法】根据 ASFV 的 CP204L 基因 CDS 区序列设计特异性引物并进行PCR 扩增，将目的基因片段与 p EASY-T5 连接构建克隆载体，利用生物信息学软件对蛋白进行生物信息学分析，用 T4 连接酶构建重组载体 pET-32a（+）-CP204L，将成功构建的重组表达载体质粒转入感受态 Rosetta（DE3）中，用 1 mmol/L IPTG、37 ℃诱导表达 8 h 后进行 SDS-PAGE 电泳鉴定蛋白表达。【结果】生物信息学分析结果表明，P30 蛋白是一种主要由无规卷曲 α 螺旋和 β 折叠组成的亲水和稳定蛋白，PCR 扩增及测序比对结果证明成功构建了重组表达载体，SDS-PAGE 电泳验证了在 24.3 ku 处有潜在的 P30 蛋白表达。【结论】通过生物信息学软件在分子层面分析了 P30 蛋白的理化性质及蛋白结构，P30 蛋白的表达为制备 ASFV 血清学诊断试剂及诊断技术奠定了基础。